乳腺肿块针吸细胞学HE染色涂片的免疫细胞化学染色

维普资讯 http://www.cqvip.com ・５７０・　临床与实验病理学杂志ＪＣｌｉｎＥａ：ｐＰａｔｈｏｌ　２００２　Ｄｅｃ；１８（５）　乳腺肿块针吸细胞学ＨＥ染色涂片的免疫细胞化学染色　陈婉娴关键词文章编号王念黎　乳腺肿瘤；活组织检查，针吸；染色法　Ｒ７３７．９　文献标识码Ｂ　２结果　中图分类号１００１—７３９９（２００２）０５—０５７０—０２　２５例ＦＮＡＣ涂片用ＡＢＣ法作ＥＲ（图ｌａ，ｂ）ＰＲ（图２ａ，　ｂ）、Ｋｉ６７（图３），ｃ—ｅｒｂＢ－２、ｐ５３（图４），结果见表１。其中７例　随后进行手术，取肿瘤组织切片行免疫组织化学染色与对应　的免疫细胞化学染色对照，结果见表２。　表１　２５例ＦＮＡＣ涂片的免疫细胞化学结果　细针吸取细胞学（ｆｉｎｅ　ｎｅｅｄｌｅ　ａｓｐｉｒａｔｉｏｎ　ｃｙｔｏｌｏｇｙ，ＦＮＡＣ）　与组织病理学一样。在必要时需作各种辅助检查。加特殊染　色、免疫组织化学等，以助确诊。由于ＦＮＡＣ涂片特点是标　本少，最多只有３～４张涂片。要进行其它检查就只能利用经　诊断后的ＨＥ染色的细胞涂片。自开展ＦＮＡＣ以来，我们一　抗体种类　总例数　结果　例数　ＥＲ　２５　ＰＲ　２４　１６　８　Ｋｉ６７　２３　２２　１　ｃ．ｅｒｂＢ－２　１６　１４　２　ｐ５３　１３　１０　３　直有利用ＨＥ染色的细胞涂片作特殊染色或免疫细胞化学　（ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｉｃｃ）染色。为了方便临床对乳腺癌　患者进行术前化疗或非手术患者化疗而提供一些有关内分　泌及增殖指数、肿瘤蛋白的表达状况等预后的有关数据，对　乳腺肿瘤患者增加了ＥＲ、ＰＲ、Ｋｉ６７、ｃ．ｅｒｂＢ－２、Ｄ５３的检查。　我们改良了过去的方法，取消了细胞核及细胞质脱色的步　骤，增加了抗原修复的程序。做了１７例，效果理想。　１材料与方法　阳性阴性阳性阴性阳性阴性阳性阴性阳性阴性　１９　６　１．１材料疑为乳腺恶性肿瘤的患者２５例，细针吸取涂片　共１０１张，经ＨＥ染色后作ＥＲ、ＰＲ、Ｋｉ６７、ｐ５３、ｃ－ｅｒｂＢ－２检查。　因为标本量不一，各例所做的种类不同。２５例中有７例在　我院行手术治疗，得以与手术组织切片的免疫组织化学染色　结果对照。ＥＲ抗体购自Ｎｏｖｏｃａｓｔｒａ公司。其它ＰＲ、Ｋｉ６７、ｃ．　ｅｒｂＢ－２、ｐ５３抗体均购自Ｉ￣ａｋｏ公司。　１．２方法　３讨论　１．２．１针吸肿物细胞涂抹于ＡＰＥＳ处理过的玻片上。即时　固定于９５％乙醇液中。　本法省略了ＨＥ染色的细胞学涂片核及胞质脱色的步　骤。免除了盐酸及乙醇在分化脱色过程中可能对抗原抗体　１．２．２　ＨＥ染色，经医师检查后，选取合适的涂片浸于二甲　苯中脱盖玻片。　１．２．３各级乙醇清洗至水。　１．２．４高压锅作抗原修复处理，ｐＨ６．０枸橼酸缓冲液２　ｍｉｎ　或ｐＨ　８．０　Ｅ￣Ｉ＇Ａ缓冲液１　ｍｉｎ　３０　ｓ。　复合物的损害。事实上所有颜色经抗原修复后都能脱掉，不　需重复。　过去认为，只有经甲醛固定及脱水包埋的过程才会使细　胞内的抗原决定簇被封闭，故需做抗原修复。而细胞学涂片　没有经过常规组织处理程序，仅固定于９５％乙醇中，故不需　要做抗原修复处理。但实践显示不经抗原修复的涂片效果　不理想。如应该ＣＫ阳性的上皮细胞，结果是阴性（图５）。　有些淋巴结穿刺细胞涂片的淋巴细胞ＬＣＡ呈阴性反应。后　１．２．５冷却后置于３％过氧化氢甲醇液中８　ｍｉｎ。　１．２．６用ＡＢＣ法行免疫细胞化学染色，ＤＡＢ显色。　１．２．７　ＥＲ、ＰＲ、ｐ５３、Ｋｉ６７褐色阳性物质在胞核．ｃ＿ｅｒｂＢ－２在　胞膜。　来我们改良了方法，增加了抗原修复的步骤。从２５例涂片　的染色结果表明，增加抗原修复的程序处理细胞涂片后，原　为阴性者可呈阳性（图６），且阳性细胞增加，阳性物质清晰　明确。在７例细胞涂片与相对的组织切片的免疫细胞化学　染色比较，结果一致，个别病例的细胞涂片的反应较组织切　片者更强。　抗原修复处理的细胞片，未发现掉细胞的现象。　１．２．８每个项目均有阳性组织片作对照。注意全过程绝对　避免发生干燥。　收稿日期：２００１—１１—１２修回日期：２００２—０３—０１　作者单位：澳门镜湖医院病理科　作者简介：陈婉娴，女，５６岁，技师。Ｔｄ：（Ｏ０８５３）３７１３３３，Ｅ—ｍａｉｌ．　ｋｗｈｉｓ＠ＩＴＩａＣ￣Ｕ．ＣｔｌＴ１．ｎｅｔ　维普资讯 http://www.cqvip.com 临床与实验病理学杂志ＪＣｌｉｎＥｃｃｐＰａｔｈｏｌ　２００２　Ｄｅｃ；１８（５）　・５７１・　、　孽　基　●●　一巷　图１　ａ．ＨＥ染色的乳腺ＦＮＡＣ涂片，经抗原修复后染ＥＲ。ＡＢＣＸ２００；ｂ．相应的组织切片染ＥＲ，ＡＢＣＸ　２００　的乳腺ＦＮＡＣ涂片，经抗原修复后染ＰＲ，ＡＢＣＸ２００；ｂ．相应的组织切片染ＰＲ，ＡＢＣＸ　２００　抗原修复后染Ｋｉ６７，ＡＢＣＸ２００　染色，结果（一）。×２０　图４　ＦＮＡＣ涂片，经抗原修复后ｐ５３染色。×２００　图２　ａ．ＨＥ染色　图３　ＨＥ染色的乳腺ＦＮＡＣ涂片经　图５胸水涂片，未经抗原修复的ＣＫ　图６胸水涂片，抗原修复后的ＣＫ染色，结果（＋）。×２０　在乳腺肿物中用ＦＮＡＣ的细胞涂片经ｌｉＥ染色，在医师　得出理想的效果。此方法简单易掌握，可作为针吸细胞学诊　断的辅助方法。　检查诊断后，再作抗原修复处理及免疫细胞化学染色是可以