1-氨基乙内酰脲分子印迹聚合物的制备和吸附性能研究

第２２卷第２期　化学研究与应用　Ｖ０１．２２．Ｎｏ．２　２０１０年２月　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　Ｆｅｂ．，２０１０　文章编号：１００４—１６５６（２０１０）０２－０１６１４３４　ｌ一氨基乙内酰脲分子印迹聚合物的　制备和吸附性能研究　裴　红，胡　静，高文惠　（河北科技大学生物科学与工程学院，河北省石家庄０５００１８）　摘要：以１．氨基乙内酰脲（ＡＨＤ）为模板分子，仪．甲基丙烯酸（ＭＡＡ）为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯　（ＥＤＭＡ）为交联剂，采用本体聚合方法合成了分子印迹聚合物（ＭＩＰ），考察了模板分子与功能单体不同比例　下制备的ＭＩＰ对模板分子的吸附性能。通过Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析，表明该印迹聚合物上存在一类等价的吸附位点，　其结合位点的离解常数Ｋ。＝４．３３ｍｍｏｌ／Ｌ。　关键词：１．氨基乙内酰脲；分子印迹聚合物；静态吸附；Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析　中图分类号：０６２３．７３６　文献标识码：Ａ　Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｒｏｐｅｒｔｙ　ｏｆ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ　ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ　ｐｏｌｙｍｅｒ　ｏｆ　１－－ａｍｉｎｏｈｙ・－ｄａｎｔｏｉｎ　ＰＥＩ　Ｈｏｎｇ，ＨＵ　Ｊｉｎｇ，ＧＡＯ　Ｗｅｎ—ｈｕｉ　（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｈｅｂｅｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ　０５００１８，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ　ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ　ｐｏｌｙｍｅｒ（ＭＩＰ）ｗａｓ　ｐｒｅｐａｒｅｄ　ｕｎｄｅｒ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｒａｔｉｏｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｅｍｐｌａｔｅ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ａｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｍｏｎｏｍｅｒ．Ｔｈｅ　ＭＩＰ　ｗａｓ　ｓｙｎｌｈｅｓｉｚｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｂｕｌｋ　ｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ，ｕｓｉｎｇ　ｌ－ａｍｉｎｏｈｙ－ｄａｎｔｏｉｎ（ＡＨＤ），ｍｅｔｈａｃｒｙｌｉｃ　ａｃｉｄ（ＭＡＡ）　ａｎｄ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ　ｄｉｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ（ＥＤＭＡ）ａｓ　ｔｅｍｐｌａｔｅ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ，ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｍｏｎｏｍｅｒ　ａｎｄ　ｃｒｏｓｓ・ｌｉｎｋｅｒ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ＭＩＰ　ｏｒ［ｔｅｍｐｌａｔｅ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｗａｓ　ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｓｃａｔｃｈａｒｄ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｌｓｏ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈｅ　ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ　ｐｏｌｙｍｅｒ　ｕｓｉｎｇ　ＭＡＡ　ａｓ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｍｏｎｏｍｅｒ　ｃｏｕｌｄ　ｆｉ￣ｒｍ　ｏｎｅ　ｋｉｎｄ　ｏｆ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｓｉｔｅ　ｂｙ　ｎｏｎｃｏｖａｌｅｎｔ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｃｏｎｓｔａｎｔ　Ｗａｓ　４．３３ｍｍｏｌ／Ｌ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：１一ａｍｉｎｏｈｙ—ｄａｎｔｏｉｎ；ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ　ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ　ｐｏｌｙｍｅｒ；ｓｔａｔｉｃ　ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ；Ｓｃａｔｃｈａｒｄ　ａｎａｌｙｓｉｓ　分子印迹（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｉｍｐｒｉｎｔｉｎｇ）又称分子烙　具有稳定性好、抗恶劣环境能力强、使用寿命长等　印，属于超分子化学中主客体化学范畴，是源于高　优点，因而受到广泛的关注和重视。在许多领域，　分子化学、生物化学、材料科学的一门交叉学科。　如色谱中对映体和异构体的分离、固相萃取、化学　分子印迹技术（ｔｏｏｌｅｃｕｌａｒ　ｉｍｐｒｉｎｔｉｎｇ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，　仿生传感器、模拟酶催化、临床药物分析、膜分离　ＭＩＴ）是模拟自然界所存在的分子识别作用，如酶　技术等领域展现了良好的应用前景【ｌＩ２　Ｊ，近年来已　与底物、抗体与抗原等，以目标分子为模板合成聚　有文献介绍ＭＩＰｓ的应用　。　合物的方法。由于这种分子印迹聚合物　１．氨基乙内酰脲（１一ａｍｉｎｏｈｙ—ｄａｎｔｏｉｎ，ＡＨＤ）是　（ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ　ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ　ｐｏｌｙｍｅｒ，ＭＩＰ）对印迹分子具　硝基呋喃类兽药中呋喃妥因的代谢产物，它可以　有生物实体的专一识别性，而且与生物实体相比　在人类胃液的酸性条件下从蛋白质中释放出来被　收稿日期：２００９－０７－０８：修回日期：２００９－ｌｌ－ｌ５　基金项目：河北省自然科学基金资助项目（Ｎｏ．Ｉ］２００８０００６６９），河北省教育厅课题（Ｎｏ．Ｚ２００５２０２）和河北科技大学杰出青年基金资助项目　（Ｎｏ．２００６ＪＣ－１４）。　联系人简介：高文惠（１９６３一）．．女，博士，教授：主要研究方向：食品安全与分离科学：Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｅｎｈｕｉｇａｏ＠１２６．ｃｏｒｎ　１６２　化学研究与应用　第２２卷　人体吸收而对人类健康造成危害。　收光谱，考察波长移动的情况。　本文以１．氨基乙内酰脲（ＡＨＤ）为模板分子，　１．２．３结合量试验　．甲基丙烯酸（ＭＡＡ）为功能单体，乙二醇二甲基　１．２．３．１　不同聚合物吸附性能考察　丙烯酸酯（ＥＤＭＡ）为交联剂，采用本体聚合方法　分别称取上述按不同比例功能单备的聚　合成了ＭＩＰ，考察了模板分子与功能单体不同比　合物ＭＩＰ及空白ＮＭＩＰ各１５ｍｇ放人１０ｍＬ具塞玻　例下制备的ＭＩＰ对模板分子的吸附性能，并进行　璃管中，加人５ｍＥ　５ｍｍｏｌ／Ｌ　ＡＨＤ的甲醇．乙腈溶液　Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析。为下一步硝基呋喃类兽药检测奠　（体积比１：１）将其混合，混合物在２５℃下恒温振　定基础。　荡２４ｈ。然后在１０００ｒ／ｍｉｎ转速下离心１０ｒａｉｎ，取　一１　实验部分　定量的上清液用ＨＰＬＣ法在２４１　ｎｍ处测定吸附　平衡后溶液浓度，根据结合前后溶液浓度变化计　１．１试剂与仪器　算聚合物对底物的结合量Ｑ，平行测定３次后取平　Ｉ．氨基乙内酰脲（ＡＨＤ，ＡＰ，Ｌａｂｏｒ　Ｄｒ．　均值。其中吸附量可由公式计算：　Ｅｈｒｅｎｓｔｏｒｆｅｒ　ＧｍｂＨ提供）；甲醇、乙腈（色谱纯，天　Ｑ＝（Ｃ。一Ｃ）　津市康科德试剂有限公司）；ｏｃ一甲基丙烯酸（ＭＡＡ，　式中，　和ｃ分别为模板分子的起始浓度和　ＡＰ，天津市化学试剂一厂，使用前需要重蒸以除去　平衡浓度（ｍｍｏｌ／Ｌ），Ｖ为溶液的体积（ｍＬ），Ｗ为　阻聚剂）；乙二醇二甲基丙烯酸酯（ＥＤＭＡ，ＡＰ，Ｎｅｗ　印迹聚合物的质量（ｇ）。　Ｊｅｒｓｅｙ，ＵＳＡ，用前需要重蒸以除去阻聚剂）；偶氮二　１．２．３．２静态吸附试验　异丁腈（ＡＩＢＮ，ＣＰ，上海市四赫维化工有限公司，　称取模板分子与功能单体按１：４反应制得的　使用前在乙醇中重结品纯化）。　ＭＩＰ及空白ＮＭＩＰ各１５ｍｇ放入ｌＯｍＬ具塞玻璃管　高效液相色谱仪ＬＣ．２０Ａ（日本岛津公司）；　中，加入５ｍＬ　ＡＨＤ的甲醇．乙腈（体积比１：１）溶　ＳＰ－７５６Ｐ型紫外可见分光光度计（上海光谱仪器有　液，浓度变化范围为０～５ｍｍｏｌ／Ｌ，混合物在２５℃　限公司）；ＳＩｔＺ．８２Ａ型恒温水浴振荡器（江苏省太　下恒温振荡２４ｈ。以下操作如１．２．３．１，计算其吸　仓医疗器械厂）。　附量Ｑ，以初始溶度Ｃ。为横坐标、吸附量Ｑ为纵坐　１．２实验方法　标绘制吸附等温线，然后进行Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析。空　１．２．１聚合物的制备　白聚合物的静态吸附实验操作和处理同上。　将１．氨基乙内酰脲（０．２ｒｅｏｔｏ１）和相应比例的甲　基丙烯酸酯ＭＡＡ放人５０ｍＬ的安瓿瓶中，加１６ｍＬ　２结果与讨论　甲醇．乙腈（体积比为１：１）使其反应，振荡３０ｍｉｎ后，　２．１　ＡＨＤ和ＭＡＡ之间相互作用的紫外光谱分析　再加交联剂ＥＤＭＡ　８ｍｍｏｌ和引发剂ＡＩＢＮ　０．０２ｇ。　超声混匀通Ｎ：脱氧１０ｒａｉｎ后，真空密封，在６０℃的　ｌ　６　恒温水浴振荡器中振荡２４ｈ，得块状固体ＭＩＰ。经　研磨、粉碎，过２００目筛，再用去离子水沉降聚合物　ｌ　２　３次除去过细粉末。将最终得到的ＭＩＰ颗粒用甲醇　＜　：乙酸（体积比９：１）洗脱至无模板分子，最后用甲醇　０．８　浸泡ｌｈ除去残留的乙酸，洗脱后的聚合物放人真　０．４　空干燥器中（６５℃）干燥１２ｈ，得到ｌ一氨基乙内酰脲　模板聚合物ＭＩＰ。空白聚合物（ＮＭＩＰ）除了未加模　０　Ｏ　板分子外其余操作同上。　２　００　２５０　３００　３５０　１．２．２结合特性试验　（ｎｍ）　配制０．Ｏｌｍｏｌ／Ｌ的ＡＨＤ甲醇．乙睛（体积比１　图１　ＭＡＡ存在下ＡＨＤ的紫外光谱图　：１）溶液，功能单体ＭＡＡ的浓度分别为０、０．　ｃ（ＡＨＤ）＝０．０１ｍｍｏｌ／Ｌ；ｃ（ＭＡＡ）／（ｍｍｏｌ／Ｌ）＝０（１），　０２ｍｏｌ／Ｌ、０．０４ｍｏｌ／Ｌ、０．０６ｍｏｌ／Ｌ、０．０８ｍｏ］／Ｌ，模板　０．０２（２），０．ｏ４（３），Ｏ．ｏ６（４），０．Ｏ８（５）　分子和功能单体的比例为１：０、１：２、１：４、１：６、１：８，在　Ｆｉｇ．１　ＵＶ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ＡＨＤ　ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆ　ＭＡＡ　２５ｃＣ恒温水浴振荡器中振荡１２ｈ，使之充分反应，　Ｃ（ＡＨＤ）＝０．０１ｍｍｏｌ／Ｌ；Ｃ（ＭＡＡ）／（ｍｍｏｌ／Ｌ）：０（１），　用相应浓度的功能单体溶液作参比测定其紫外吸　０．Ｏ２（２），０．０４（３），Ｏ．０６（４），０．０８（５）　第２期　裴　红等：１．氨基乙内酰脲分子印迹聚合物的制备和吸附性能研究　１６３　采用ＭＡＡ作为功能单体，在浓度为０．Ｏ１　ｍｏｌ／　分析它们之间的主要作用力为氢键作用力。　Ｌ的ＡＨＤ甲醇．乙腈（体积比为１：１）溶液中，分别　２．２功能单体用量对分子印迹聚合物吸附性能　加入不同量的功能单体，当功能单体与模板分子　的影响　的摩尔比分别为０，２：】．，４：１，６：１和８：１时，１一氨基　在固定模板分子和交联剂的条件下，改变　乙内酰脲紫外光谱的变化如图１所示。　ＭＡＡ的加入量，试验考察了模板分子与功能单体　从图１上可看出，在１．氨基乙内酰脲的甲醇．　的摩尔比对聚合物吸附性能的影响，结果见表１。　乙腈（体积比为１：１）溶液中加人ＭＡＡ，随着功能　为了比较印迹效果定义印迹因子ＩＦ，由公式计算：　单体浓度的增大，ＡＨＤ的最大吸收峰不断红移，紫　ＩＦ＝ＱＭｌＰ／ＱＮＭｌＰ　外吸收峰的红移现象说明功能单体与模板分子有　其中Ｑ　为印迹聚合物吸收模板的量，ＱⅢ　作用，并且根据模板分子和功能单体的分子结构　为非印迹聚合物吸收模板的量。　表１　功能单体对聚合物吸附性能的影响　Ｔａｂｌｅ　１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｍｏｎｏｍｅｒ　Ｏｉｌ　ｔｈｅ　ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｐｒｏｐｅｒｔｙ　ｏｆ　ｐｏｌｙｍｅｒ　２　ｊ　ｌ　ｌ　Ｏ　Ｏ　８　６　４　２　Ｏ　８　从表１的试验结：　也可以看出，当模板分子　与功能单体ＭＡＡ的摩尔比为１：４时，制备的分子　印迹聚合物不仅具有较大的吸附量，且具有最好　。Ｄ　、　的印迹效果；这可能是因为在较低的模板分子与　￡　Ｕ　功能单体摩尔比（如１：２）时，模板分子印迹不充　０　分，使得印记聚合物吸附量低；而当模板分子与功　能单体ＭＡＡ的摩尔比过高（如１：８）时，过量的功　能单体会导致聚合物中非特异性识别位点增加，　０　ｌ　２　ｊ　４　）　印迹效果降低。故试验确定模板分子与功能单体　Ｑ（ｍｇ／ｇ）　ＭＡＡ的摩尔比为１：４。　图３　ＡＨＤ聚合物吸附性的Ｓｃａｔｃｈａｒｄ曲线　２．３　聚合物对模板分子的吸附选择性及　Ｆｉｇ．３　Ｓｃａｔｃｈａｒｄ　ｃｕｒｖｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ　Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析　ｎａｔｕｒｅ　ｏｆ　ＭＩＰ（ＡＨＤ）　通过静态吸附试验研究了１一氨基乙内酰脲在　ＭＩＰ对ＡＨＤ具有印迹能力，ＡＨＤ可通过氢键和空　分子印迹聚合物（Ｍ１Ｐ）和非印迹聚合物（ＮＭＩＰ）上　间匹配达到吸附；而对于ＮＭＩＰ来说，虽然对ＡＨＤ　的吸附行为，吸附等温线见图２。　有非特异性吸附，但由于位置关系，不具有作用位　点的匹配性，因此ＮＭＩＰ对ＡＨＤ吸附力弱。　４．０　在分子印迹研究中常用Ｓｃａｔｃｈａｒｄ模型来评价　萄３．０　聚合物的结合特性，通过Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析可获得吸　面　三　附位点的结合类型、结合平衡常数及最大结合量　２．０　等重要信息。依据Ｓｃａｔｃｈａｒｄ方程：　１　０　Ｑ／Ｃ：（Ｑｉｎａ：（－Ｑ）／ＫＤ　其中式中Ｑ为ＭＩＰ对模板分子的吸附量，Ｃ　Ｏ．Ｏ　０　ｌ　２　３　４　５　为模板分子的平衡浓度，Ｑ一为结合位点的最大表　Ｃ（ｍｍｏｌ／Ｌ）　观结合数，Ｋ。为结合位点的平衡解离常数。　图２　ＭＩＰ和ＮＭＩＰ对ＡＨＤ的吸附等温线　１．氨基乙内酰脲在其ＭＩＰ上的Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析　Ｆｉｇ．２　Ｂｉｎｄｉｎｇ　ｉｓｏｔｈｅｒｍ　ｏｆ　ＭＩＰ　ａｎｄ　ＮＭＩＰ　ｔｏ　ＡＨＤ　见图３。由图３可见，Ｓｃａｔｃｈａｒｄ图中近似直线的点　由图２可见印迹聚合物对ＡＨＤ具有一定的　进行线性拟合，可得到一条线性良好的曲线，表明　吸附能力，而非印迹聚合物对ＡＨＤ吸附小。表明　ＭＩＰ存在一类等价的结合位点，对ＡＨＤ呈现均匀　１６４　化学研究与应用　第２２卷　的亲和力。从图３得其回归方程为Ｑ／Ｃ：１．９６－０．　２３１１Ｑ，由此求得离解常数Ｋ。＝４．３３ｍｍｏｌ／Ｌ，最大　表观结合位点数Ｑ　＝８．５０ｍｇ／ｇ。　３　结论　以１．氨基乙内酰脲为模板分子，　．甲基丙烯　采用本体聚合方法合成了ＭＩＰ，考察了模板分子　与功能单体不同比例下制备的ＭＩＰ对模板分子的　吸附性能，并进行Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析。试验表明，印迹　聚合物对模板分子具有印迹能力，且通过氢键和　空间匹配作用，由Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析可知ＡＨＤ和功能　单体ＭＡＡ形成一类等价的结合位点，其结合位点　的离解常数ＫＤ＝４．３３ｍｍｏｌ／Ｌ。　酸为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，　参考文献：　［１］Ａｄｂｏ　Ｋ，Ｎｉｃｈｏｌｓ　Ｉ　Ａ．Ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　Ｓｏｌｉｄ・ｐｈａｓｅ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　Ｕｓｉｎｇ　Ｔｒｏｇｅｒ’Ｓ　Ｂａｓｅ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ　Ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ　Ｐｏｌｙｍｅｒｓ［Ｊ］．　Ａｎａ／ｙｔ／ｃａ　Ｃｈｉｍｉｃａ　Ａｃｔａ，２００１，４３５（１）：ｌ１５—１２０．　【２］Ｔａｋｅｕｃｈｉ　Ｔ，Ｈａｇｉｎａｋａ　Ｊ．Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｅｎｓｉｎｇ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ　ｕｓｉｎｇ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ　ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ　ｐｏｌｙｍｅｒｓ　［Ｊ］．　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　Ｂ，１９９９，７２８（１）：１－２０．　［３］周杰，何锡文．分子模板聚合物在分析化学中的应用　［Ｊ］．分析测试学报，１９９８，１７（５）：８７－９１．　［４］Ｓｈｉ　ｘ，Ｗｕ　Ａ，Ｑｕ　Ｇ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　Ｃｈａｒａｃｔｅｉｒｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍｏｌｅｃｕｌｒａｌｙ　Ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ　Ｐｏｌｙｍｅｒｓ　ｂａｓｅ（ｉ　ｏｎ　Ｍｅｔｈａｃｒｙｌｉｃ　Ａｃｉｄ　ｆｏｒ　Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｄｒｕｇｓ［Ｊ］．Ｊ－Ｂ／ｏｍａｔｅｒ／ａ／ｓ，　２００７．２８：３７４１－３７４９．　［５］Ｌｖ　Ｙ，Ｌｉｎ　ｚ，Ｆｅｎｇ　Ｗ，ｅｔ　ａ１．Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｌａｒｇｅ　Ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｄｉｍｅｔｈｏａｔｅ　ｆｒｏｍ　Ｔｅａ　Ｌｅａｖｅｓ　ｂｙ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ　Ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ　Ｐｏｌｙｍｅｒｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｅ，　职　，２００７，３６：　２２ｌ一２２９．　［６］Ｂｅｌｔｒａｎ　Ａ，Ｃａｒｏ　Ｅ，Ｍａｒｃｅ　Ｒ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　Ｃａｒｂａｍａｚｅｐｉｎｅ－Ｉｍｐｒｉｎｔｄｅ　Ｐｏｌｙｍｅｒ　ｆｏｒ　Ｓｏｌｉｄ－　Ｐｈａｓｅ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ　Ｕｒｉｎｅ　ａｎｄ　Ｗａｓｔｅｗａｔｅｒ［Ｊ］．Ａｎａｌｒｔｉｃａ　ＣｈｉｍｉｃａＡｃｔａ，２００７。５９７：６．１１．　（责任编辑钟安永）