转录因子是一种具有特殊结构、行使基因表达功能的蛋白质分子,也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合,这些特异性的序列被称为顺式作用元件,转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合,从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验(luciferase assay)是检测这类转录因子和其靶启动子中的
一般长共轭分子具有较强紫外吸收,刚性分子平面具有较高的荧光效率 本来不发生荧光或荧光较弱的物质与金属离子形成配位化合物后,如果刚性和共平面性增加那么就可以发射荧光或增强荧光,位阻效应导致的共平面性下降则荧光减弱,对于顺反异构体,反式空间位阻小,共平面性大,荧光强 增加π电子的取代基使荧...
荧光素酶作为一种理想的报告基因,在转录因子结合位点与启动子活性分析领域具有广泛应用。本期将详细探讨双荧光素酶在转录因子与启动子互作验证方面的应用。一、真核生物基因表达概述真核生物基因表达是一个复杂而有序的过程,涉及众多反式因子和顺式作用元件的相互作用。基因表达在各个层次上都受到精密...
转录因子,即反式作用因子,是能与基因的顺式作用元件特异性相互作用,调节基因转录的DNA结合蛋白。双荧光素酶报告基因检测时,通常分为研究转录因子是增强子还是抑制子,或研究其他因素(如磷酸化、分子物质等)对转录因子活性的影响。这一过程中通常涉及3个质粒:报告基因质粒、转录因子表达质粒和内参质粒。
双荧光素酶实验验证启动子活性需要几个质粒:双荧光素酶实验验证启动子活性需要3个质粒。
ChIP-seq的主要研究方向包括顺式元件和反式作用因子的鉴定。研究思路中,前期探索性实验包括充分的文献和数据库调研,以及转录因子/辅因子/组蛋白修饰基因的干扰/敲除/过表达实验。例如,根据文献推测转录因子Irf8可能在第三类骨细胞分化过程中起关键作用,通过Irf8敲除实验对比骨细胞分化情况,确定其作用...
该系统能够快速对微量样本进行扩增,然后Cas12a与crRNA结合切割dsDNA靶标,激活Cas12a的反式切割活性,与荧光报告基团相结合进行核酸检测。DETECTR系统在HPV、ASFV等多种病毒的诊断及鉴别方面展现出高灵敏度和特异性,为分子诊断提供了全新的检测平台。同时,王金团队基于Cas12a的反式切割活性,开发了一种名...
微藻 - 生物学特性与其他生物相比,微藻具有如下特点:1、最低等的、自养的放氧植物;2、单细胞结构,呈群体或丝状的,大多数是浮游藻类;3、种类繁多、分布极其广泛的一个类群;4、在海洋、淡水湖泊等水域,或是潮湿的土壤、树干等处,在有光及潮湿的任何地方都能生存;5、生长周期短(几天);6、微藻...
载体系统包括包装成分和载体成分:包装成分由 HIV 21 基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建,能反式提供产生病毒颗粒所需的蛋白;载体成分与包装成分互补,含有包装、逆转录和整合所需的 HIV 21顺式作用序列。同时具有异源启动子控制下的多克隆位点及在此位点插入的目的基因。为降低两种成分同源重组...
维生素A 维生素A也被叫做“眼睛的维生素”。它具有保护眼睛粘膜的功能,因此治疗眼症特别有效。维生素B1、B12、B6 对治疗眼睛疲劳特别有效的维生素B群。眼睛聚集相当多的神经细胞,因此需要对这些神经细胞注入更丰沛的维生素,以保持眼睛健康。维生素C 它可以防止水晶的氧化。将维生素C与维生素B2一起摄取,更...