蛋白质热稳定性研究取得新突破：从“短板理论”到零样本哈密顿模型 近日，力文所与中国农业科学院涂涛课题组的合作研究在蛋白质热稳定性改造方面取得了重大进展。该研究成果在《Advanced Science》上发表，提出了一种新颖的“短板理论”，并结合基于大模型的“零样本哈密顿模型”来优化酶的热稳定性。一、背景与挑战 蛋白

应用：NusA-Tag常用于提高不溶性靶蛋白的可溶性，但需与其他纯化标签联用。五、SUMO（小泛素相关修饰物）特性：SUMO是一种小分子泛素相关修饰蛋白，具有分子伴侣的功能，能促进蛋白的正确折叠，提高稳定性。优点：不仅可以作为重组蛋白表达的融合标签，还具备分子伴侣的功能。对热和蛋白酶具有耐受性，有助...

SUMO不仅可以作为重组蛋白表达的融合标签，还具备分子伴侣的功能，能促进蛋白的正确折叠，对热和蛋白酶具有耐受性，有助于保持目的蛋白的稳定性。优势：有与其配套的蛋白酶（专一性强），切割的特异性极高，不存在任何氨基酸的残留，适用于重组蛋白表达。综上所述，在选择蛋白纯化标签时，需要根据具体的实验...

3. **相分离法**：利用相似相溶的萃取原理，在低温下，Triton X-114和Triton X-100等表面活性剂溶解于水相，而内毒素则溶解在其中。随着温度升高，Triton的溶解度降低，与内毒素一起形成沉淀，通过离心去除。此法适用于热稳定性蛋白的内毒素去除，并需建立残留检测方法。4. **超滤法**：基于分子...

硫氧还蛋白（TrxA）：TrxA标签具有独特的热稳定性，能够在高温条件下将杂蛋白变性去除，而重组蛋白得以保存。这一特性使得TrxA在重组蛋白的纯化过程中具有显著优势。5. 标签移除高效性 小泛素样修饰蛋白（SUMO）：SUMO标签能够被SUMO蛋白酶特异识别并高效降解，使得后续标签移除过程准确高效。这对于需要去除...

重组表达蛋白纯化后发生沉淀的原因：重组表达蛋白纯化后发生沉淀，主要原因包括以下几点：镍离子脱落：在Ni纯化的过程中，部分镍离子会脱落，这些脱落的镍离子作为重金属，会对蛋白的凝集和沉积起到促进作用。溶液环境不适：人为制造的溶液环境可能并不完全符合蛋白本身的生理环境要求，特别是离子浓度和pH值。...

这些突变体不仅保持了原有的热稳定性和抗原亲和力，还解决了C端标签可能对体内分布造成的影响。使用ProA的亲和层析方法纯化Nbs具有优势，因为它只选择正确折叠的蛋白质，从而提高了纯化的效率和纯度。这一研究成果为Nbs的纯化提供了新的策略和方法。

蛋白质稳定：主要针对白葡萄酒。高温处理（60~80℃短时间处理）可使白葡萄酒中的蛋白质变性凝固，形成沉淀后过滤去除，防止装瓶后遇冷出现冷浑浊。例如，长相思、赛美蓉等芳香型白葡萄酒若含较多不稳定蛋白，热处理可提前解决浑浊问题。加速陈化：短暂高温（如50~60℃持续数小时）可促进红葡萄酒中单宁与...

热沉淀则是通过提高温度使蛋白质变性而实现的。对于热稳定性较差的蛋白质，提高温度会导致其发生变性沉淀。这种现象可用于根据蛋白质稳定性的差异进行蛋白质的热沉淀，从而实现目标产物的分离纯化。此外，还有一些其他沉淀法，如非离子型聚合物、聚电解质和某些多价金属离子可用作蛋白质的沉淀剂。例如，非...

相反，嗜热微生物则能在高温环境下生存和繁殖。其体内的蛋白质具有较高的热稳定性，能够在70-80度的温度下保持活性。即使温度达到100度，这些蛋白质也不会立即凝固。这是因为嗜热微生物在长期进化过程中，已经适应了高温环境，并发展出了独特的蛋白质结构来抵御高温的影响。综上所述，蛋白质的凝固温度...